當前位置:青島盛瀚色譜技術有限公司>>離子色譜耗材>>前處理小柱>> 黃曲霉毒素總量免疫親和柱
一、產(chǎn)品概述:
黃曲霉毒素(Aflatoxin)是黃曲霉、寄生曲霉等真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物,被世界衛(wèi)生組織癌癥研究機構(gòu)劃分為1類致癌物,同時又是一種毒性較大的物質(zhì)。廣泛存在于各種食物中,如玉米、花生、大米和小麥等谷物及其副產(chǎn)品。飼料中的黃曲霉毒素B1經(jīng)過動物代謝后產(chǎn)生的黃曲霉毒素M1仍然具有很強的毒性和致癌性,廣泛存在于牛奶、血液、組織等食品中。黃曲霉毒素作為肝癌的三大誘因之一,也是胃癌,腸癌等疾病的主要原因,對人類的健康構(gòu)成很大威脅。世界各國對食品和飼料中的黃曲霉毒素都有嚴格的標準。
二、反應原理:
本產(chǎn)品測定的基礎是抗原抗體反應。黃曲霉毒素抗體固定于柱內(nèi)凝膠上,樣品中的黃曲霉毒素經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢通過黃曲霉毒素免疫親和柱,在柱內(nèi)黃曲霉毒素與抗體特異性結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱,除去未結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫黃曲霉毒素,注入到分析儀器中進行檢測。
三、產(chǎn)品包裝組成:
每盒中包含25支黃曲霉毒素總量免疫親和柱及1套相應說明書。
四、IAC性能:
1、性能參數(shù)
柱容量 | ≥200ng |
黃曲霉毒素(回收率) | >90% ±5% |
2、交叉反應率
黃曲霉毒素B1 | 100% | 黃曲霉毒素G1 | 101% |
黃曲霉毒素B2 | 86% | 黃曲霉毒素G2 | 83% |
五、注意事項:
1、黃曲霉毒素對人體有害,應戴手套操作。
2、使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液用5%
濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存,不可凍存。
5、使用前,免疫親和柱需回至室溫(22-25℃)。
6、取樣量:根據(jù)實際情況可以適當增減,但不可太少,同時提取液體積要按比例隨之改變。
7、pH:上柱液pH要在6~8之間,若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
六、需要的材料但盒中不提供:
設備 | 器皿耗材 | 試劑 |
HPLC 泵流操作架 高速均質(zhì)器高速粉碎機 | 量筒(50/200mL) 漏斗 收集瓶 容量瓶(100mL/1L) 微量移液器:單道 定量濾紙 玻璃微纖維濾紙 離心管(50mL) | 色譜級甲醇 蒸餾水 AFT標準品 |
七、試劑配制:
1、提取液:甲醇-水(7:3)
移取700mL甲醇,加蒸餾水300mL混合。
八、樣品處理:真菌毒素分析的zui大誤差來源是樣品的收集和取樣過程,所以要保證樣品收集和取樣的代表性。
(一)花生、大米、玉米、小麥及其制品,植物油
脂和飼料
1、稱取25g粉碎的樣品(植物油脂直接取樣)移至均質(zhì)器中,再稱取5g氯化鈉加入均質(zhì)器中;
2、加125mL甲醇-水(7:3)溶液高速均質(zhì)2min;
3、4000r/min離心5min或用濾紙過濾;
4、取10mL濾液并加入30mL蒸餾水稀釋;
5、用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待用;
(二)醬油
1、稱取50g樣品與2.5g氯化鈉加入均質(zhì)器中;
2、加100mL甲醇-水(7:3)溶液高速均質(zhì)2min;
3、4000r/min離心5min或用濾紙過濾;
4、取10mL濾液并加入40mL蒸餾水稀釋;
5、用玻璃微纖維濾紙過濾, 取過濾后液體待用;
(三)食醋
1、稱取5g樣品于25mL容量瓶中,加1.0g氯化鈉,用pH7.0磷酸鹽緩沖溶液稀釋定容至25.0mL;
2、4000r/min離心5min或用濾紙過濾;
3、取10mL濾液并加入10mL蒸餾水稀釋;
4、用玻璃微纖維濾紙過濾, 取過濾后液體待用;
注意:pH7.0磷酸鹽緩沖溶液:稱取8g氯化鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2gKCL,用990mL蒸餾水溶解,然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0,zui后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。
九、操作程序:符合GB/T 18979-2003國標方法
1、連接:將免疫親和柱后蓋取下,用剪刀剪開,重新蓋上,連接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上樣:準確移取10mL樣品提取液轉(zhuǎn)移至注射器內(nèi),打開下端堵頭;
3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱,建議重力過柱;
4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗,棄去全部流出液,并使2-3mL空氣通過柱體;
5、洗脫: 為保證洗脫充分,建議以2.0mL色譜級甲醇分兩步進行洗脫,重力洗脫即可。首先,將免疫親和柱內(nèi)液體排干,下端蓋上堵頭,加1.0mL甲醇于柱管內(nèi)孵育60秒以上(孵育即甲醇在柱子中浸泡),重力過柱,當溶劑通過柱子后;再加入1.0mL甲醇重復上述洗脫步驟,zui后輕微加壓排凈洗脫液,合并洗脫液供檢測用。
十、操作流程圖示
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱: |
PriboFast®黃曲霉毒素總量免疫親和柱 | |
產(chǎn)品貨號: | PriboFast® IAC-011-3 |
產(chǎn)品描述: | 黃曲霉毒素單克隆抗體 |
包裝單位: | 25支/盒 |
儲存條件: | 2~8℃,切勿冷凍 |
保質(zhì)期: | 18個月 |
本公司可提供的真菌毒素檢測產(chǎn)品
類型 | 產(chǎn)品名稱 |
ELISA酶聯(lián) 免疫試劑盒 | 黃曲霉毒素總量(AFT) |
黃曲霉毒素B1(AFB1) | |
黃曲霉毒素M1(AFM1) | |
嘔吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZON) | |
伏馬毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
免疫親和柱 | 黃曲霉毒素總量(AFT) |
黃曲霉毒素B1(AFB1) | |
黃曲霉毒素M1(AFM1) | |
嘔吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZON) | |
伏馬毒素(FUM) | |
T-2毒素(T-2) | |
赭曲霉毒素(OTA) | |
真菌毒素六合一免疫親和柱 | |
可定制多毒素復合免疫親和柱 | |
多功能凈化柱 | MFC220(Don+Niv) |
MFC221(FUMB1+B2+B3) | |
MFC226(Aft+Zon) | |
MFC227(Aft+T-2) | |
MFC228(Aft+Pat) | |
MFC229(Och A+B) | |
膠體金快速 檢測卡 | 黃曲霉毒素B1(AFB1) |
黃曲霉毒素M1(AFM1) | |
嘔吐毒素(DON) | |
玉米赤霉烯酮(ZON) | |
三聚氰胺 |
注:本公司提供毒素固體液體標準品及質(zhì)控樣品